人类白细胞抗原（HLA）B27是HLA-B位点上的一个重要的等位基因，早在年，相关研究就证实HLA-B27抗原的表达与强直性脊柱炎（AS）有高度的疾病相关性，而且这种相关是迄今己知的HLA与疾病的关联中是最强和最典型的。
AS患者一旦在临床上出现特征骶髂关节炎和脊柱改变，病程就已经进入中期，骶髂关节己经发生明确的局限性骨侵蚀、硬化，己经失去最佳的时机，而AS发病隐匿症状多样，容易漏诊或误诊，通过HLA-B27检测对AS进行早期诊断和治疗有非常重要的意义，HLA-B27检测也已经成为临床支持诊断也是判断疾病严重程度及预后的重要依据。
另外，脊柱关节病（SpA）与HLA-B27的相关性从70%~90%到40%~50%不等，HLA-B27检查也有助于这一类疾病的早期诊断。
如何选取灵敏度、特异度合适的检测方法，现阶段检测试剂是否有所改进，这些问题对HLA-B27检测至关重要，今天我们从检测方法角度了解一下。
根据HLA-B27表达特点，用于临床检测的常见方法包括微量淋巴细胞*法（MLCTAssay）、双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）、磁珠酶联免疫分析法（IMS-ELISA）、流式细胞仪分析法（FCM）、聚合酶链反应-序列特异性引物法（SSP-PCR）以及实时荧光PCR（qPCR）法等，我们逐一分析各方法的优缺点：
?微量淋巴细胞*试验（MLCTAssay）
优点：无需特殊仪器，易于操作，一般实验室均可操作。
缺点：标本存放不能超过8h，感染可以使细胞膜表面B27分子数量及结构改变，影响结果，影响因素比较多，如细胞纯度、补体的活性和差异、抗体的纯度和效价、HLA的高度多态性、细胞表面B27抗原分子表达数目及抗原交叉性、操作者的主观影响等，容易造成假阳性和假阴性的结果。
?酶联免疫吸附试验（ELISA）
优点：其结果与MLCTAssay检测符合率为99%，且不受感染因素影响，重复性好。
缺点：准确度相对偏低，容易误诊、漏诊。
?磁珠酶联免疫分析法（IMS-ELISA）
优点：操作简便，操作时间短，需标本用量少，结果客观。
缺点：不适合大批量操作。
?流式细胞仪分析法（FCM）
优点：全自动仪器检测，克服了人为误差，重复性高，结果判断准确，为目前最理想的方法；
缺点：仪器成本较高，医院批量检测应用。传统检测试剂与HLA-B7抗原有一定的交叉反应，可能出现假阳性。
?聚合酶链反应-序列特异性引物法（SSP-PCR）
优点：标本不受时间限制，陈旧血、冷冻血也可用于DNA的提取，判断结果客观准确，特异性强，灵敏度高，稳定性好。
缺点：检测的是HLA-B27的基因型,而血清学技术检测的是HLA-B27的表型，两者所反映情况并不一致，即携带B27基因并不等于细胞表面一定有B27抗原的表达，且操作较复杂，技术要求较高。
?实时荧光PCR法（qPCR）
优点：直接检测HLA-B27抗原的编码基因，不会与HLA-B7产生交叉反应，能准确的作出判断。
缺点：与SSP-PCR的缺点一致，而且操作需要成本高，需要有专业的实验室及人员，目前未普及。
另外，这几种方法的的敏感性和特异性也不尽相同：
总体来说，流式细胞仪分析法（FCM）测定HLA-B27的表达，操作简便、灵敏度高、特异性强、可重复性高、结果稳定，更适合于临床应用。那么如何排除检查时出现假阳性，这成为进一步提高检测特异性的关键。
来源：骨科时间
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